2023年10月18日，来自浙江中医药大学的Xiaodan Guan，Liang Jin等人在 Nature Scientific Reports（IF:5.228）上发表了一篇名为《Polydatin prevent lung epithelial cell from Carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae injury by inhibiting biofilm formation and oxidative stress》的文章。众所周知，肺炎克雷伯菌(KP)是一种革兰氏阴性机会致病菌，常引起医院获得性感染，如血流感染、呼吸道和泌尿道感染，尤其是基础疾病1。此外，KP对最有效的抗生素的耐药性日益增强。在各种耐药机制中，外排泵的过度表达是KP耐药的重要机制。KP 的一个重要毒力特征是能够形成生物膜，这使得传统抗菌剂难以渗透；因此，它会反复引起慢性细菌行为感染。研究人员认为在中成药银花平肝颗粒有一种活性成分名为：虎杖甙（PD），它有强大的抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗菌能力因而受到世界范围的广泛关注。然而，关于PD对CRKP的影响知之甚少。在这项研究中，研究人员评估了PD对细菌水平和细菌-细胞共培养水平的抗生物膜和外排泵的抑制作用，也评估了PD对细胞凋亡、活性氧（ROS）、线粒体的抑制作用。通过 qRT-PCR 和蛋白质印迹在人肺上皮细胞中验证了作用机制。在此项研究中表明，PD 可抑制细菌生物膜形成和外排泵 AcrAB-TolC 表达，并通过调节 ROS 和 Nrf-2 调节的抗氧化途径来抑制 CRKP 诱导的细胞损伤。

图1.CRKP 生物膜的表征。虎杖甙的结构( A )。细菌生长的生长曲线分析（B）和CRKP的PD杀灭时间曲线（C）。通过结晶紫测定 ( D )测定 PD 对 CRKP 生物膜形成的抑制作用。CRKP 的 SEM 图像 ( F )。CRKP + PD ( G )的 SEM 图像。在倒置显微镜下观察添加或不添加PD诱导的CRKP形态变化（E）。 与单独 CRKP 组相比，# P  < 0.05 和## P < 0.01。

图2.PD对CRKP中PCR和蛋白表达的影响。Acr A、Acr B 和 Tol C( A )的 mRNA 表达。孵育 16 小时后，在存在或不存在 PD 的情况下，通过 RT-PCR 评估 CRKP 感染细胞的MarA、RobA、SoxS和RamA ( B )、Ompk35 ( C )、KPC、NDM 和 OXA-48 ( D )。 与单独 CRKP 组相比，# P  < 0.05 和## P < 0.01。 与 CTX 组相比，* P  < 0.05 和** P < 0.01。

图3.PD 减弱 CRKP 诱导的细胞凋亡。( A ) CCK8 分析了与不同浓度的 PD 孵育 24 小时后的细胞活力。LDH检测PD引起的CRKP诱导的细胞损伤( B )。( E )通过流式细胞术评估活细胞比例和死细胞比例变化的代表性结果，并显示统计结果( C - D )。## 与对照组相比，P < 0.01； 与单独 CRKP 组相比，* P  < 0.05 和** P < 0.01。模型：CRKP（MOI = 30）单独组。

原文链接：https://www.nature.com/articles/s41598-023-44836-7#Sec1