鲍曼不动杆菌BamA重组蛋白的交叉反应性及免疫治疗潜力
作者:车斯友 时间:2024-04-10 点击数:
鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,Ab)是医院感染的重要病原菌,主要引起呼吸道感染,也可引发败血症、泌尿系感染、继发性脑膜炎等。随着耐药性日益严重,已引起临床和微生物学者的严重关注。开发和接种相应的疫苗能够有效的预防鲍曼不动杆菌的感染。针对鲍曼不动杆菌的疫苗研究也是众多研究人员正在攻克的方向。2021年2月11日发表在《Microbes and Infection》(IF=2.7)的一篇名为《Cross-reactivity and immunotherapeutic potential of BamA recombinant protein from Acinetobacter baumannii》的文献研究了鲍曼不动杆菌BamA重组蛋白(rAbBamA)的免疫反应,并评估该靶点的交叉反应性,证明抗rAbBamA抗体对小鼠鲍曼不动杆菌感染提供了保护性反应。
为了证实ELISA检测的结果,并验证rAbBamA免疫产生的血清的特异性,进行了免疫印迹检测。在这里,免疫诱导了针对rAbBamA的抗体,这些抗体能够识别鲍曼不动杆菌(AB162菌株)细菌裂解液中具有相似分子量(约96 kDa)的单个蛋白带(图1b)。当使用免疫前血清时,没有发现可识别的蛋白带。这些结果表明,抗rabbama抗体既能识别重组蛋白,也能识别天然蛋白。
图1.a)间接ELISA法显示抗rAbBamA小鼠血清的抗体效价;b)免疫印迹法检测rAbBamA和鲍曼动芽胞杆菌裂解蛋白对免疫前和抗rAbBamA小鼠血清的抗体效价。
与没有免疫的小鼠比较,实验组的小鼠细菌负荷明显降低。
图2.rAbBamA免疫降低了小鼠腹腔感染鲍曼不动杆菌后肾脏的细菌负担,提高了小鼠的存活率。a)肾脏细菌负荷(CFU/g)量化显示免疫组最多减少4 CFU/g; b)感染后监测小鼠7天,与阴性对照组(未免疫)相比,免疫组的动物存活率提高了40%。
接着实验人员对抗rabbama与其他革兰氏阴性菌的交叉反应性。由于BamA是一种膜蛋白,与其他革兰氏阴性菌的类似功能蛋白具有同源性,因此评估该蛋白作为免疫原性靶点的特异性非常重要。本研究评估了抗rabbama抗体对其他在医院获得性感染中非常重要的细菌(如大肠杆菌、肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌)的omp的交叉反应性。用SDS-PAGE和抗rabbama多克隆血清进行Western blot检测。这些抗体显示出与大肠杆菌和肺炎克雷伯菌35 kDa区域蛋白的反应性。然而,没有发现铜绿假单胞菌蛋白或免疫前血清的结合。
图3.抗rAbBamA血清对其他革兰氏阴性菌膜蛋白的Western blot检测。蛋白质条带约为96 kDa (Lane 1:鲍曼不动杆菌)和30 kDa (Lane 2和3分别为大肠杆菌和肺炎克雷伯菌)。这30 kDa蛋白分别为OmpA和OmpC。铜绿假单胞菌无交叉反应性。
DOI: 10.1016/j.micinf.2021.104801
全文链接:https://doi.org/10.1016/j.micinf.2021.104801